1982年,kaufman等人依據(jù)DHFR的擴增原理設(shè)計了哺乳動物細胞(CHO)表達系統(tǒng)進行復雜糖蛋白表達,它是目前最廣泛應用的表達體系。CHO表達系統(tǒng)具有準確的轉(zhuǎn)錄后修飾功能,表達的蛋白在分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和生物學功能方面最接近于天然蛋白分子;即可貼壁生長,又可以懸浮培養(yǎng);具有遺傳的穩(wěn)定性和可重復性;純化工藝簡單,應用前景廣泛。但是也存在目標蛋白表達量低;篩選穩(wěn)定高表達細胞株周期長、難度大;規(guī)模化生產(chǎn)成本高等難點。
本公司在多年的工作和研究中形成了自己的特點和優(yōu)勢:
1、高效篩選工程細胞株的方法:在篩選穩(wěn)定高效表達目標蛋白的工程細胞株等方面,建立了周期短、效率高的標準操作規(guī)程,周期由通常的1年半縮短到1年;
2、培養(yǎng)過程的可控性:考慮細胞培養(yǎng)的復雜性,建立了標準操作規(guī)程,規(guī)范細胞培養(yǎng)過程、具有可追溯性;
3、采用連續(xù)灌流培養(yǎng)工藝,細胞密度可達108cells/ml,目標蛋白獲得高表達,收獲培養(yǎng)上清的體積是生物反應器體積的60~80倍,大大降低了生產(chǎn)成本。